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人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

日期:2017-03-15 09:11:56 人氣:1148

應用領域:
生物產業
實驗設備:
檢測樣品:
重組人白細胞介素
檢測項目:
乙腈殘留
下載地址:

重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定

1 儀器配置

①磐諾 GC A91 氣相色譜儀,配置 FID 檢測器

②自動頂空進樣器(上海/HS-16A)

2 實驗方法

2.1 色譜條件

進樣口:220℃,分流比 10:1

色譜柱:DB-WAX 30m×0.32mm×0.50ìm,2.4ml/min(恒流模式)

爐膛:45℃

FID:250℃,H2 30ml/min,Air 300ml/min,Make-up 30ml/min

頂空進樣器:平衡溫度 75℃,定量管溫度 100℃,傳輸管溫度 100℃,平衡時間 30min

2.2 對照品溶液及供試品溶液制備對照品溶液配制精密稱取乙腈 7.8mg  250ml 容量瓶中,蒸餾水定容,作為對照品溶液。供試品溶液配制精密稱取供試品約 0.5g  5ml 容量瓶中,蒸餾水定容,作為供試品溶液。

2.3 乙腈含量測定

分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各 2ml,置 20ml 頂空瓶中,密封,軋蓋,置頂空進樣器中,測定。

3 實驗結果

3.1 重現性試驗

精密量取 2.2 中所述對照品溶液 2.0ml,共份,置個頂空瓶中,按 2.1~2.3 中方法測定,結果峰面積的相對標準偏差(RSD) 3.08%。

表 1 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定重現性試驗

編號

1

2

3

4

5

6

平均值

 

 

 

 

 

 

 

 

峰面積

32.82

34.95

32.72

32.77

34.82

33.64

33.62

RSD%

 

 

 

3.08

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

圖 1 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定重現性試驗

3.1 線性關系考查

精密量取對照品溶液 2.0、1.0、0.5、0.2、0.1ml,各 2 份于 10 個頂空瓶中,再分別加入蒸餾水 0、1.0、1.5、1.8、1.9ml 后,密封,軋蓋,置頂空進樣器中,測定。以積分面積為縱坐標,2ml H20 中乙腈含量為橫坐標,線性擬合,回歸方程為 Y=0.5426X+0.04702,相關系數 R2=0.9998。測試結果見表和圖 2。

重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定線性關系試驗

編號

X

 

Y 峰面積

 

 

2ml H20 中乙腈含量/ìg

 

 

 

 

Test-1

Test-2

平均值

 

 

 

 

 

1

62.4

34.25

33.6

33.93

 

2

31.2

16.73

17.32

17.03

 

3

15.6

8.29

8.16

8.23

 

4

6.24

3.5

3.88

3.69

 

5

3.12

1.71

1.68

1.70

 

回歸方程:Y=0.5426X+0.04702,相關系數 R2=0.9998

 人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

圖 2 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定線性關系試驗

3.3 樣品測定

參考 2.2 中測試。結果見表 3。

 

 

表 3

五批重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定結果

 

 

 

 

 

供試品批號

稱樣量/mg

積分面積

測定結果

 

 

 

 

粉劑 20121102

34.2

未檢出

<0.004%

粉劑 20123012

36.7

未檢出

<0.004%

粉劑 20121130

31.9

未檢出

<0.004%

液體 20130303**

904.8

1.88

0.00093%

液體 20130408**

524.0

1.55

0.0013%

備注:粉劑樣品,稱量后加入 2.0ml H2O 分析;

液體樣品,稱量后加入 H2O 定容至 5ml 后,取 2.0ml 分析。

 人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

圖 3 五批重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定色譜圖


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